谷類(lèi)及中藥材中多真菌毒素檢測(cè)液質(zhì)質(zhì)法的快速前處理方法

真菌毒素為真菌增殖時(shí)產(chǎn)生的次生有毒代謝產(chǎn)物。真菌的孢子能透過(guò)空氣、風(fēng)力、水流和動(dòng)物等方式來(lái)傳播。只要有少量蛋白質(zhì)、淀粉、脂質(zhì)及水分，真菌就能生長(zhǎng)，因此谷物、果實(shí)類(lèi)、玉米、花生、飼料及中藥材等都可能檢出真菌毒素。黃曲霉毒素具有潛在的肝毒害及致病性，其性質(zhì)穩(wěn)定，因此易出現(xiàn)在食物鏈中。

應(yīng)用方案概述：

本篇以FaTEx-gen快速萃取凈化柱進(jìn)行前處理除雜，使用LC-MS/MS儀器分析谷類(lèi)、花生、花生醬、豆類(lèi)、飼料、中藥材等基質(zhì)中的11種真菌毒素，包含黃曲du素類(lèi)、赭曲du素A及鐮孢菌毒素類(lèi)（伏馬毒素、脫氧雪腐鐮刀菌烯醇（嘔吐毒素）、玉米赤霉毒素等），外標(biāo)法定量分析。

樣品制備流程如下：

秤樣2g左右，加入一定體積的樣品萃取溶液，高速震蕩機(jī)震蕩30分鐘，于3500rpm離心5分鐘，得到上清液。取一定體積的上清液加入FaTEx-gen 快速萃取凈化柱，收集全部濾液混勻。取一定體積的濾液，氮吹回溶后上機(jī)到LC-MS/MS分析。

Agilent 6470液相層析串聯(lián)式質(zhì)譜儀搭配ZORBAX Eclipse Plus C18色譜柱，關(guān)于前處理詳細(xì)步驟和儀器分析條件，歡迎索取！

分析結(jié)果如表所示，回收率落在81.9~112.7%范圍內(nèi)，CV%皆小于20，顯示此為一快速穩(wěn)定的檢驗(yàn)方法。

實(shí)驗(yàn)結(jié)果如下：

表1、真菌毒素11項(xiàng)藥劑之添加濃度

表2、谷類(lèi)樣品中11項(xiàng)霉菌毒素之回收率和變異系數(shù)

*重復(fù)性，n=3

結(jié)論：

1、本篇以FaTEx-gen  SPE柱凈化樣品，采用液質(zhì)質(zhì)（LC-MSMS）的儀器分析方法，檢測(cè)谷類(lèi)樣品（黃豆及花生）之多重霉菌毒素（黃曲mei素類(lèi)、赭曲du素A及鐮孢菌毒素類(lèi)）共11項(xiàng)，每次分析時(shí)間13分鐘，為快速準(zhǔn)確的檢驗(yàn)方法。

2、 FaTEx-gen萃取凈化柱可針對(duì)復(fù)雜檢體基質(zhì)加強(qiáng)凈化，降低基質(zhì)干擾。

3、 以FaTEx-gen柱檢測(cè)添加多重毒素標(biāo)準(zhǔn)品之谷類(lèi)樣品（添加濃度：黃曲mei素B1 Aflatoxin B1,黃曲mei素B2  Aflatoxin B2,  黃曲mei素G1  Aflatoxin G1,  黃曲mei素G2 Aflatoxin G2,赭曲霉毒素 A  Ochratoxin A：2.5 ng/g，T-2 toxin, HT-2 toxin：5 ng/g；嘔吐毒素Deoxynivalenol, 玉米赤霉烯酮 Zearalenone：25 ng/g；伏馬毒素 B1  Fumonisin B1,伏馬毒素 B2  Fumonisin B2：100 ng/g）回收率落在81.9~112.7%范圍內(nèi)，變異系數(shù)皆小于20，為穩(wěn)定之檢驗(yàn)方法。

4、 2015年藥典中的中藥材：根及根莖類(lèi)：遠(yuǎn)志；果實(shí)種子類(lèi)：大棗、肉豆蔻、決明子、麥芽、陳皮、使君子、柏子仁、胖大海、蓮子、桃仁、檳榔、酸棗仁、薏苡仁；動(dòng)物類(lèi)：水蛭、地龍、全蝎、僵蠶。