蜈蚣中黃曲霉毒素等11種真菌毒素液質質檢測方法

一、藥典和測定法要求：

根據《中國藥典》2020年版規定：中藥材蜈蚣及飲片需檢測水分、總灰分和黃曲霉毒素，其中黃曲霉毒素按照真菌毒素測定法（通則2351）測定，“本品每1000g含黃曲霉毒素B1不得超過5μg，黃曲霉毒素B1，黃曲霉毒素B2，黃曲霉毒素G1，黃曲霉毒素G2的總量不超過10μg"。

真菌毒素測定法（通則2351）：多種真菌毒素檢測的液質質法說明如下：

此方法充分利用液質質儀器的高靈敏度和高精確度的優勢，一次進樣分析多種真菌毒素，大大提高了效能，節約人力和時間成本，因此越來越多地實驗室開發了多種真菌毒素檢測的液質質方法。

真菌毒素測定法（通則2351）中，上述篩查測定方法的前處理凈化采用傳統HLB柱，經過活化、平衡、淋洗、洗脫地過程后，采用外標法進行定量分析。此方法比采用若干種免疫親和柱的前處理凈化方法簡便許多，但仍然被困于傳統SPE的操作步驟，前處理步驟仍顯繁瑣。

二、FaTEx-CM 蜈蚣中真菌毒素檢測專用柱

因此我們開發出FaTEx-CM 蜈蚣中真菌毒素檢測專用柱，原理上通過填料保留雜質，所得濾液極為目標物，不需要活化平衡淋洗洗脫，操作步驟極其簡單，節省試劑、設備和耗材，因此在大大提高效率地同時，節省大量的人力和費用成本。

同時，此蜈蚣真菌毒素專用柱復合多種有效成分材料填充在凈化柱中，開發專用的操作方法平衡11種真菌毒素的回收率和RSD，經過若干次地不懈努力，終于取得合適配方和操作步驟。通過一次FaTEx-CM蜈蚣專用柱的凈化處理，上機到LC-MSMS分析，得到的結果符合定量分析的法規要求。

三、前處理方法之蜈蚣中真菌毒素檢測專用柱

2 蜈蚣均質后，稱取樣品2g左右

2 加一定體積V1的去離子水，靜置10分鐘

2 加一定體積V2的酸化乙腈水溶液震蕩萃取30min

2 15℃，3500 rpm離心5min

2 取一定體積的上清液V3倒入FaTEx-CM_2vac專用柱，每秒1滴流出

2 收集全部濾液，取一定體積V4的濾液，加一定體積V5的去離水稀釋

2 0.22µm filter過濾后上機LC-MS/MS分析

四、儀器分析方法

五、11種真菌毒素的清單，歡迎聯絡詢問回收率和RSD